實驗計劃書范文
篇一:實驗計劃書格式要求
廣醫(yī)生化技能大賽
實驗設(shè)計書格式要求 (A4紙)
一、排版
1、頁面設(shè)置:頁邊距上下左右各用2.4cm。
2、行距:全部采用1.5倍行距。
3、頁碼:每頁下端居中,全部采用阿拉伯?dāng)?shù)字排序,如1,2,3等,不要寫“第1頁”或“-1-”等。
4、頁眉:全部不加頁眉。
二、標(biāo)題
1、實驗名稱(居中、三號宋體、加粗)
2、參賽者資料(居中、小四宋體):學(xué)院 年級專業(yè) 姓名 宿舍電話 手機號碼 (按字母排序)
三、摘要
1、“摘要”兩字用黑體加粗4號字居中,字與字之間留4個字距。摘要正文用宋體小4號字。
2、“關(guān)鍵詞”三個字用黑體加粗小4號字,與摘要正文左對齊。
3、關(guān)鍵詞宋體小4號字,各關(guān)鍵詞之間空2個字距,且不加標(biāo)點符號。
四、正文
(1、前言;2、實驗?zāi)康模?、實驗原理;4、實驗設(shè)備;5、實驗材料及試劑:a.試劑的配制b.材料的處理;6、實驗操作步驟;7、結(jié)果及計算;8、注意事項;9、費用預(yù)算)
1、正文層次標(biāo)題題末不加標(biāo)點符號。各層次一律用阿拉伯字連續(xù)編號,如:“1”,“2.1”,“3.1.2”,一律左頂格,后空一字距寫標(biāo)題。一級標(biāo)題從前言起編,一律用黑體加粗4號字,左頂格;二級標(biāo)題用黑體加粗小4號字,左頂格;三級標(biāo)題用楷體加粗小4號字,左頂格。
2、正文其他部分全部用宋體小4號字。
3、圖題放圖下方居中,用阿拉伯?dāng)?shù)字編號,如:圖1,圖號后不加任何符號,空1個字距寫圖題;表題放表上方居中,用阿拉伯?dāng)?shù)字編號,如:表1,表號后不加任何符號,空1個字距寫表題。
4、文中的拉丁學(xué)名采用右斜體字母。
五、參考文獻
1、“參考文獻”四字用黑體加粗4號字居中,字與字之間空1個字符。
2、中文參考文獻采用宋體小4號字,英文參考文獻采用Times New Roman小4號字。
六、附錄
如有附錄,放在參考文獻后。“附錄”兩字用黑體加粗4號字居中,字與字之間留4個字距。
檢驗系各位同學(xué):
請于4月7日前將實驗設(shè)計書,報名表(通知書附件1)和作品信息匯總表打包發(fā)至我的郵箱,文件名為參賽作品題目+組長姓名,郵件名為生化+作品名+組長姓名, ,并于4月8日將實驗設(shè)計書和報名表的紙質(zhì)版交給我,謝謝。
篇二:實驗策劃書
實驗一 水中氟化物的測定-離子選擇電極法
水中氟化物的含量是衡量水質(zhì)的重要指標(biāo)之一,生活飲用水水質(zhì)限值為1.0mg/L。測定氟化物的方法有氟離子選擇電極法、離了色譜法、比色法和容量滴定法,前兩種方法應(yīng)用普遍。本實驗采用氟離子選擇電極法測定游離態(tài)氟離子濃度,當(dāng)水樣中含有化合態(tài)(如氟硼酸鹽)、絡(luò)合態(tài)的氟化合物時,應(yīng)預(yù)先蒸餾分離后測定。
一、實驗?zāi)康暮鸵?1.掌握用離子活度計或pH計、晶體管毫伏計及氟離子選擇電極測定氟化物的原理和測定方法,分析干擾測定的因素和消除方法。
2.復(fù)習(xí)教材第二章中的相關(guān)內(nèi)容;在預(yù)習(xí)報告中列出被測原電池,簡要說明測定方法原理和影響測定的因素。 二、儀器
1.氟離子選擇電極(使用前在氟離子內(nèi)沖液中充分浸泡1-2h,膠塞拔掉)。 2.飽和甘汞電極(上面的膠塞拔掉,一共兩個)。
3.精密pH計或離子活度計、晶體管毫伏計,精確到0.1mv。 4.磁力攪拌器和塑料包裹的攪拌子。 5.容量瓶:100mL、50mL。
6.移液管或吸液管:10.00mL、5.00mL。
7.燒杯:50mL、100mL。 8、試紙。 三、試劑
所用水為去離子水或無氟蒸餾水。 1.氟化物標(biāo)準(zhǔn)貯備液:稱取0.2210 g基準(zhǔn)氟化鈉(NaF)(預(yù)先于105~110℃烘干2 h或者于500~650℃烘干約40 min,冷卻),用水溶解后轉(zhuǎn)入1000 mL容量瓶中,稀釋至標(biāo)線,搖勻。貯存在聚乙烯瓶中。此溶液每毫升含氟離子100 μg。
2.乙酸鈉溶液:稱取15 g乙酸鈉(CH3COONa)溶于水,并稀釋至100 mL。 3.鹽酸溶液:2 mol/L。
4.總離子強度調(diào)節(jié)緩沖溶液(TISAB):稱取5.88 g二水合檸檬酸鈉和8.5 g硝酸鈉,加水溶解,用鹽酸調(diào)節(jié)pH至5~6,轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶中,稀釋至標(biāo)線,搖勻。
5.飲用水樣1,2。 四、測定步驟
1.儀器準(zhǔn)備和操作
按照所用測量儀器和電極使用說明,首先接好線路,將各開關(guān)置于“關(guān)”的位置,開啟電源開關(guān),預(yù)熱15min,調(diào)零,以后操作按說明書要求進行。
2.氟化物標(biāo)準(zhǔn)溶液制備 用氟化鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液、吸液管和100mL容量瓶制備每毫升含氟離子10μg的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
用吸液管取1.00、3.00、5.00、10.00、20.00 mL氟化物標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別置于5只50 mL容量瓶中,加入10mL總離子強度調(diào)節(jié)緩沖溶液,用水稀釋至標(biāo)線,搖勻。分別移入100 mL聚乙烯杯中,放入一只塑料攪拌子,按濃度由低到高的
順序,依次插入電極,連續(xù)攪拌溶液,讀取攪拌狀態(tài)下的穩(wěn)態(tài)電位值(E)。在每次測量之前,都要用水將電極沖洗凈,并用濾紙吸去水分。在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪制E-lgcF-標(biāo)準(zhǔn)曲線,濃度標(biāo)于對數(shù)分格上,最低濃度標(biāo)于橫坐標(biāo)的起點線上。
4.水樣測定
用無分度吸液管吸取適量(5ml)水樣,置于50 mL容量瓶中,用乙酸鈉或鹽酸溶液調(diào)節(jié)至近中性,加入10mL總離子強度調(diào)節(jié)緩沖溶液,用水稀釋至標(biāo)線,搖勻。將其移入100 mL聚乙烯杯中,放入一只塑料攪拌子,插入電極,連續(xù)攪拌溶液,待電位穩(wěn)定后,在繼續(xù)攪拌下讀取電位值(Ex)。在每次測量之前,都要用水充分洗滌電極,并用濾紙吸去水分。根據(jù)測得的毫伏數(shù),由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試液氟化物的濃度,再根據(jù)水樣的稀釋倍數(shù)計算其氟化物含量。
5.空白試驗
用去離子水(5ml)代替水樣,按測定樣品的條件和步驟測量電位值,檢驗去離子水和試劑的純度,如果測得值不能忽略,應(yīng)從水樣測定結(jié)果中減去該值。 五、結(jié)果處理
1.繪制E(mV)-lg[F-]標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.計算水樣中氟化物的含量。
實驗數(shù)據(jù)記錄如下: 得:
分別將ΔE=-96和ΔE=-103帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線,得 水樣一:lg(F-)=1.14 C(F-)=13.80 mg/L 水樣二:lg(F-)=1.28 C(F-)=19.05 mg/L
實驗二 水中鉻的測定
廢水中鉻的測定常用分光光度法,是在酸性溶液中,六價鉻離子與二苯碳酰二肼反應(yīng),生成紫紅色化合物,其最大吸收波長為540nm,吸光度與濃度的關(guān)系符合比爾定律。如果測定總鉻,需先用高錳酸鉀將水樣中的三價鉻氧化為六價,再用本法測定。
一、實驗?zāi)康暮鸵?/p>
1.掌握六價鉻和總鉻的測定方法;熟練應(yīng)用分光光度計。
2.預(yù)習(xí)第二章第六節(jié)關(guān)于水和廢水中金屬化合物的測定原理和方法。 二、六價鉻的測定
(一)儀器
1.分光光度計,比色皿(1cm、3cm)。 2.50mL具塞比色管,移液管,容量瓶等。 (二)試劑
1.(1+1)硫酸(1體積水與1體積硫酸混合,硫酸往水中注入)。 2.(1+1)磷酸。
3.鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液:稱取于120℃干燥2h的重鉻酸鉀(優(yōu)級純)0.2829g,用水溶解,移入1000mL容量瓶中,用水稀釋至標(biāo)線,搖勻。每毫升貯備液含0.100μg六價鉻。
4.鉻標(biāo)準(zhǔn)使用液:吸取5.00mL鉻標(biāo)準(zhǔn)貯備液于500mL容量瓶中,用水稀釋至標(biāo)線,搖勻。每毫升標(biāo)準(zhǔn)使用液含1.00μg六價鉻。使用當(dāng)天配制。
5.二苯碳酰二肼溶液(顯色劑):稱取二苯碳酰二肼(簡稱DPC,C13H14N4O)0.2g,溶于50mL丙酮中,加水稀釋至100mL,搖勻,貯于棕色瓶內(nèi),置于冰箱中保存,顏色變深后不能再用。
(三)測定步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:取9支50mL比色管,依次加入0、0.20、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.00mL鉻標(biāo)準(zhǔn)使用液,用水稀釋至標(biāo)線,加入(1+1)硫酸0.5mL和(1+1)磷酸0.5mL,搖勻。加入2mL顯色劑溶液,搖勻。5—10min后,于540nm波長處,用1cm比色皿,以水為參比,測定吸光度A并作空白校正。以吸光度為縱坐標(biāo),相應(yīng)六價鉻含量為橫坐標(biāo)繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2.水樣的測定:取5ml(含Cr6+少于50μg)待測水樣于50mL比色管中,用水稀釋至標(biāo)線,測定方法同標(biāo)準(zhǔn)溶液。進行空白校正后根據(jù)所測吸光度從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得Cr6+含量。
(四)數(shù)據(jù)處理
式中:m——從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的Cr6+量(μg);
V——水樣的體積(mL)。
實驗數(shù)據(jù)記錄如下:
水樣一:ΔA=0.002 帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線得Cr6+=1.104×10-3 mg/L
水樣二:ΔA=0.003 帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線得Cr6+=2.48×10-3 mg/L
(五)注意事項
1.用于測定鉻的玻璃器皿不應(yīng)用重鉻酸鉀洗液洗滌。
2.Cr6+與顯色劑的顯色反應(yīng)一般控制酸度在0.05—0.3mol/L(1/2H2SO4)范圍,以0.2mol/L時顯色最好。顯色前,水樣應(yīng)調(diào)至中性。顯色溫度和放置時間對顯色有影響,在15℃時,5—15min顏色即可穩(wěn)定。
3.如測定清潔地面水樣,顯色劑可按以下方法配制:溶解0.2g二苯碳酰肼于100mL95%的乙醇中,邊攪拌邊加入1+9硫酸400mL。該溶液在冰箱中可存放一個月。用此顯色劑,在顯色時直接加入2.5mL即可,不必再加酸。但加入顯色劑后,要立即搖勻,以免Cr6+可能被乙酸還原。
實驗三 化學(xué)需氧量的測定(高錳酸鉀法)
在酸性條件下,高錳酸鉀具有很高的氧化性,本實驗采用酸性高錳酸鉀法,向被測水樣中定量加入高錳酸鉀溶液,加熱水樣,水溶液中多數(shù)的有機污染物都可以氧化,加入定量且過量的草酸鈉還原過量的高錳酸鉀,最后再用高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液返滴過量的草酸鈉至微紅色為終點,由此計算出水樣的耗氧量。 一、實驗?zāi)康暮鸵?/p>
1.初步了解環(huán)境分析的重要性及水樣的采集和保存方法
2.對水樣中耗氧量COD與水體污染的關(guān)系有所了解 3.掌握高錳酸鉀法測定水中COD的原理及方法 二、實驗原理 測定時,在水樣中加入硫酸及一定量的高錳酸鉀,置沸水浴中加熱使其中的還原性物質(zhì)氧化,剩余的高錳酸鉀用一定量過量的草酸鈉還原,再以高鞥酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液返滴草酸鈉過量部分。在煮沸過程中, KmnO4 和還原性物質(zhì)作用:
4MnO4 - + 5C + 12H+ = 4Mn2+ + 5CO2 + 6H2O
剩余的 KmnO4 用 Na2C2O4 還原:
2MnO4 - + 5C2O42- + 16H+ = 2Mn2+ +10CO2 + 8H2O 再以高錳酸鉀返滴草酸鈉過量部分,通過實際消耗高錳酸鉀的量來計算水中還原性物質(zhì)的量。
三、主要試劑
0.002mol/L KmnO4 、 0.005mol/L Na2C2O4 、1:3H2SO4 四、實驗步驟
1.0.005mol/L Na2C2O4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
篇三:實驗計劃書
實驗計劃書(初定)
此為初步計劃書,還有很多不成熟甚至錯誤之處 x年xx月號 ,望老師給予指出!
本實驗總體上分為三大步。(1)生理實驗部分:本部分主要進行papaya硬度和細胞壁相關(guān)酶類活性的測定。(2)分子實驗部分:本部分主要是獲得papaya細胞壁相關(guān)酶類的基因序列以及由RNA差異表達譜獲得細胞壁代謝酶基因等的表達特征。(3)驗證實驗部分:本部分主要通過實時熒光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)驗證并初步確定與“橡皮化”相關(guān)的細胞壁代謝酶基因的家族成員。
生理實驗部分是第一步需要實施的,也是比較獨立的部分,初步定為40天左右的時間結(jié)束。分子實驗和驗證實驗部分是本實驗的核心,這兩部分緊密結(jié)合,需要同步進行,首先是各種樣本(CK,ETH,1-MCP)的獲得,隨后是各樣本的RNA提取,然后委托深圳華大基因公司進行轉(zhuǎn)錄組測序并從轉(zhuǎn)錄組中篩選細胞壁代謝相關(guān)的基因序列,采用5RACE及3RACE的方法,獲得這些基因的全長序列以及構(gòu)建差異表達譜進行相關(guān)差異基因篩選等生物信息分析,最后通過實時熒光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)驗證并初步確定與“橡皮化”相關(guān)的細胞壁代謝酶基因的家族成員。
一,買果。
二,采后預(yù)處理:
采后立即運回實驗室,剔除病果和機械損傷果,選用形狀、大小、外觀顏色相對一致的番木瓜果實,剪留0.5cm長果柄為實驗材料。先用1.0 g/L的次氯酸鈉溶液洗果10 min,再用0.5g/L的施保功溶液浸泡果實10 min,取出晾干后備用。
三,樣品分組(四組):
1.對照組:果實用PE(聚乙烯)保鮮袋包裝,輕綁袋口,置于低溫(15℃)的恒溫箱中貯藏。
2.1.0μl/L的1-MCP處理(橡皮化果實):在室溫條件下(25℃),用濃度1.0μl/L的1-MCP密閉熏蒸處理果實24 h,取出果實后用PE保鮮袋包裝,輕綁袋口,置于15℃(冷藏)、RH(相對濕度)為90%的條件下貯藏。
3.0.5 g/L的乙烯利處理:在室溫條件下(25℃),用濃度0.5 g/L的乙烯利處理果實3分鐘,取出果實后用PE保鮮袋包裝,輕綁袋口,置于15℃(冷藏)、RH為90%的條件下貯藏。
四,實驗過程:
貯藏過程中每隔2d(催熟果實)和5d取樣一次,鮮果或-70℃貯存,為以后進行基因表達水平的研究。
取樣的同時,進行以下生理指標(biāo)的測定:
1.果實硬度:
使用果實硬度計(FHM-1型,日本產(chǎn))進行測定。
2.PG(多聚半乳糖醛酸酶)活性:
稱取1g果肉,加入5mL(先加3 mL,后用2mL沖洗) 0.05mol/L,pH4.6的檸檬酸緩沖液低溫存放(含5%NaCl和1.8 mM的EDTA(乙二胺四乙酸)),冰浴研磨勻漿。然后在10000轉(zhuǎn)離心30min,將上清液進行透析,用0.05mol/L,pH4.6的檸檬酸緩沖液作為透析液,透析液不含EDTA和NaCl。透析條件:4℃條件下放24小時,中間換一次緩析液,透析完的溶液用于酶活力的測定。該操作在冰浴下進行。
PG活性測定:PG 活性測定以1% 多聚半乳糖醛酸 (PGA , 美國Sigma 公司) 為底物, 反應(yīng)混合液為:1% PGA0.5 mL、醋酸鈉緩沖液(pH 4.6)1.5 mL、酶提取液0.5 mL, 0.5 mL的水(總反應(yīng)體系為3mL), 40 ℃反應(yīng)60 min, 立即加入1mLDNS (3, 5-二硝基水楊酸)終止反應(yīng)。再加入沸水中煮沸10 min 后冷卻,于波長540 nm 下定量分析酶水解生成的半乳糖醛酸含量。以3mL蒸餾水+1 mLDNS作為對照(CK)。以每小時釋放1mg 的D-半乳糖醛酸(美國Sigma 公司) 為1 個酶活性單位(U)。以標(biāo)準(zhǔn)D-半乳糖醛酸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗重復(fù)3 次。對照不加酶液,以緩沖液代替。
3.PME(果膠甲酯酶)酶活性:
取2g果肉,加3mL 預(yù)冷的1 mol/L NaCl 和2 g PVP(聚乙烯基吡咯烷酮)置于研缽中,充分研磨后,轉(zhuǎn)移到離心管中,再用2mL NaCl潤洗,倒入離心管中,于冰浴中放置1小時,每隔20 min震蕩一次,在4℃下,10000轉(zhuǎn)離心30 min,收集上清液,用0.01 mol/L NaOH調(diào)
至pH為7.5, 于4℃保存?zhèn)溆谩y定:在試管中依次加入1.5mL 0.5% (w/v)的果膠放冰箱備用,有效期5天、0.5 mL0.01%溴麝香酚蘭指示劑棕色瓶(pH為7.5),1.0 mL水,0.5 mL酶液(酶液最后加入),總反應(yīng)體系為3.5 mL 。立即將試管放入37℃的水浴鍋中30 min,以蒸餾水為CK。取出試管后冷卻,迅速測定其在620 nm波長一分鐘內(nèi)的變化。以每min變化0.01為一個活力單位(U),以U/ g.FW表示。
4.纖維素酶(CX):
取0.625g羧甲基纖維素鈉溶于0.2 mol/L(pH為4.6)的醋酸鈉緩沖液中,加幾滴氫氧化鈉調(diào)PH值到7.0,放低溫下溶解,定容至100 mL。
酶液的制備同PG。
活性測定:反應(yīng)體系為1 mL CMC(羧甲基纖維素鈉)溶液,酶液1 mL,醋酸鈉緩沖液(pH 4.6)1.0 mL(總反應(yīng)體系為3mL),40 ℃保溫60 min,取出加入3,5一二硝基水楊酸(DNS)1 mL終止反應(yīng);加入沸水中煮沸5 min,冷卻后用分光光度計在540nm處比色測定吸光度值。以3mL蒸餾水+1 mLDNS作為對照(CK)。每小時由底物生產(chǎn)1μmol葡萄糖所需的酶量定義為一個酶活力單位(U)。
纖維素酶活力(U/g)=〔葡萄糖含量(mg)×酶液提取總體積(mL)×5.56〕/〔反應(yīng)液中酶液加入量(mL)×樣品重(g)×?xí)r間(h)〕 式中5.56——1 mg葡萄糖的微摩爾數(shù)(1000/180=5.56);
用3, 5-二硝基水楊酸測定生成的葡萄糖做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
5.內(nèi)切木聚糖酶活性:
篇四:試驗方案與試驗計劃書
第三章 試驗方案與試驗計劃書
知識目標(biāo):
● 學(xué)會田間試驗方案的制訂方法; ● 掌握田間試驗計劃書的書寫格式。
技能目標(biāo):
● 學(xué)會制訂田間試驗方案的技能; ● 學(xué)會制訂田間試驗計劃書的技能。 第一節(jié) 制訂田間試驗方案方法
田間試驗計劃是試驗實施的依據(jù),更是試驗成敗的關(guān)鍵。
田間試驗實施是把試驗計劃具體實施。主要包括試驗地的選擇、田間區(qū)劃、試驗材料準(zhǔn)備、播種或移栽、田間管理、觀察記載與測定、收獲和測產(chǎn)等。
任何田間試驗的全過程,包括選題與設(shè)計,布置與種植,管理與觀察,收獲與測產(chǎn),以及總結(jié)與推廣,所有這些工作就是田間試驗的實施。要搞好田間試驗,必須做好田間試驗全過程的所有環(huán)節(jié)。如果試驗中某一個環(huán)節(jié)沒有做好,試驗就會失敗。因此,在田間試驗實施中,必須以認真、仔細、精益求精的態(tài)度進行工作。
一、試驗方案的設(shè)計方法
1.單因素試驗方案
單因素試驗方案設(shè)計一般由試驗因素的若干水平加適當(dāng)對照處理即可。其設(shè)計要點是確定因素的水平范圍和水平間距。水平范圍是指試驗因素水平的上、下限范圍,其大小取決于研究目的及試驗研究的深入程度。水平間距是指因素相鄰水平間的級差,水平間距要適當(dāng),過大沒有實際意義,過小試驗效果易被誤差掩蓋,試驗結(jié)果不能說明問題。例如在育種試驗中,將新育成的若干品種與原有品種進行比較以測定其改良的程度,此時,品種是試驗的唯一因素,各育成品種與原有品種即為各個處理水平,在試驗過程中,除品種不同外,其他環(huán)境條件和栽培管理措施都應(yīng)嚴格控制一致。又例如為了明確某一品種的耐肥程度,施肥量就是試驗因素,試驗中的處理水平就是幾種不同的施肥量,品種及其他栽培管理措施都相同。表3-1大豆鉀肥用量試驗方案即為單因素試驗方案。
表3-1大豆鉀肥施用量試驗方案
處理號 1 2 3 4
處理名稱 對照 低鉀 中鉀 高鉀
鉀肥用量(kg/hm2)
0 50 100 150
2.復(fù)因素試驗方案
生物體生長受到許多因素的綜合作用,采用復(fù)因素試驗,有利于探究并明確對生物體生長有關(guān)的幾個因素的效應(yīng)及其相互作用,能夠較全面地說明問題。復(fù)因素試驗的效率常高于單因素試驗。復(fù)因素試驗方案設(shè)計常有兩種類型,一是全面實施方案,二是不完全實施方案。
(1)全面實施方案 其方案設(shè)計要點是:所有試驗因素在試驗中處于完全平等的地位,每個因素的每個水平都與另外因素的所有水平相互配合構(gòu)成試驗處理組合。全面實施方案是最常用較簡單的復(fù)因素試驗方案,其優(yōu)點是因素水平能均衡搭配。下面以大豆播期和氮肥用量二因素三水平試驗方案設(shè)計為例說明,試驗因素及水平見表3-2,試驗方案見表3-3。
表3-2大豆播期、氮肥用量試驗因素水平
試驗水平
1 2 3
試驗因素
播期 5月10日 5月20日 5月30日
表3-3大豆播期、氮肥用量全面實施試驗方案
處理號 1 2 3 4 5 6 7 8 9
播期 5月10日 5月10日 5月10日 5月20日 5月20日 5月20日 5月30日 5月30日 5月30日
氮肥用量(kg/hm2)
50 100 150 50 100 150 50 100 150
氮肥用量(kg/hm2)
50 100 150
表3-3試驗方案中,處理組合的確定方法是,先由播期的1水平(5月10日)分別與氮肥用量的3個水平配合,得到1、2、3三個處理組合;再由播期的2水平(5月20日)分別與氮肥用量的3個水平配合,得到4、5、6三個處理組合;最后由播期的3水平(5月30日)分別與氮肥用量的3個水平配合,得到7、8、9三個處理組合。這樣就得到上述3×3全面實施試驗方案。如果因素過多,試驗規(guī)模很大,往往難以全面實施。
(2)不完全實施方案 由全面實施方案的一部分處理構(gòu)成試驗方案,稱為不完全實施方案。不完全實施方案多采用正交設(shè)計、正交回歸設(shè)計、旋轉(zhuǎn)回歸設(shè)計、最優(yōu)設(shè)計等設(shè)計方法來制訂。其設(shè)計方法可參看相關(guān)書籍。
制訂試驗計劃前,要先確定田間試驗課題。在選擇和確定田間試驗課題時,必須從生產(chǎn)需要出發(fā)。一般應(yīng)根據(jù)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)發(fā)展需要提出來的研究任務(wù)、本地區(qū)生產(chǎn)過程要解決的問
題、存在著爭執(zhí)的生產(chǎn)問題及國內(nèi)外其他地區(qū)的先進經(jīng)驗來確定試驗課題。
二、制訂試驗方案原則
擬訂一個正確有效的試驗方案,要包含以下幾個方面的原則:
1.首先應(yīng)該回顧以往的研究進展,通過調(diào)查交流、文獻索引等來明確試驗?zāi)康模纬蓪λ芯康闹黝}及其外延的設(shè)想,使待擬訂的試驗方案能針對主題確切而有效地解決問題。
2.根據(jù)試驗?zāi)康拇_定供試因素及其水平
供試因素一般不宜過多,應(yīng)該抓住1~2個或少數(shù)幾個主要因素來解決關(guān)鍵性問題。每個因素的水平數(shù)目也不宜過多,且各水平間距要適當(dāng),使各水平能有明確區(qū)分,并把最佳水平范圍包括在內(nèi)。如果涉及試驗因素多,一時難以取舍,或者對各因素最佳水平的可能范圍難以作出估計,這時可以將試驗分為兩階段進行,即先做單因素的預(yù)備試驗,通過拉大幅度進行初步觀察,然后根據(jù)預(yù)備試驗結(jié)果再精細選取因素和水平進行正規(guī)試驗。預(yù)備試驗常常采用較多的處理數(shù),較少或不設(shè)重復(fù);正規(guī)試驗則精選因素和水平,設(shè)置較多的重復(fù)。為了不使試驗規(guī)模過大而失控,試驗方案原則上應(yīng)力求簡單。
3.試驗方案中應(yīng)包括對照
品種比較試驗中,常常統(tǒng)一規(guī)定同一生態(tài)區(qū)域內(nèi)使用的對照品種,以便作為各試驗單位共同的比較標(biāo)準(zhǔn)。
4.擬訂試驗方案時,必須正確處理試驗因素及試驗條件間的關(guān)系
一個試驗中只有供試因素的水平在變動,其他因素都保持一致,固定在某一個水平上。根據(jù)交互作用的概念,在一種條件下某試驗因子的最優(yōu)水平,換了一種條件,便可能不再是最優(yōu)水平,反之亦然。這在品種試驗中最明顯。因而在擬訂試驗方案時必須做好試驗條件的安排,絕對不要以為強調(diào)了試驗條件一致性就可以獲得正確的試驗結(jié)果。例如品種比較試驗時要安排好密度、肥料水平等一系列試驗條件,使之具有代表性和典型性。由于單因素試驗的試驗條件必然有局限性,可以考慮將某些與試驗因素可能有互作(特別負互作)的條件作為試驗因素一起進行復(fù)因素試驗,或者同一單因素試驗在多種條件下分別進行試驗。
第二節(jié) 田間試驗計劃書
試驗課題確定后,在進行試驗之前,應(yīng)制訂一份文字計劃,叫試驗計劃,試驗計劃是試驗的根據(jù),有了試驗計劃,才能將試驗?zāi)康摹⒁竺鞔_地記載下來和表達出來,試驗進行才有依據(jù),才能有條不紊地做好一切準(zhǔn)備工作,才能使每個參加試驗的人行動一致,才能使其他有關(guān)人員對試驗提出寶貴的意見。因此,任何一個田間試驗必須擬訂試驗計劃,且要在試驗開始前一、二個月或更早時間進行擬訂。為使試驗計劃擬訂的科學(xué)合理和參試人員都能比較深刻地理解試驗?zāi)康摹⒁蠛头椒āK袇⒃嚾藛T,都應(yīng)參加擬訂試驗計劃。計劃確定后,每個參試人員都應(yīng)遵守和執(zhí)行計劃的規(guī)定,不得私自隨便更改。如果在執(zhí)行中發(fā)現(xiàn)計劃中有遺漏的地方或由于條件的變化,原計劃有不適應(yīng)的地方,也必須經(jīng)過大家討論后,才能修改。
一、擬訂田間試驗計劃書的要求
擬訂一個正確有效的試驗計劃書,應(yīng)遵循以下基本要求:
1.目的明確
擬訂試驗計劃書前應(yīng)通過回顧以往研究進展,通過調(diào)查交流、文獻檢索等明確試驗?zāi)康模纬蓪λ芯恐黝}及其外延的設(shè)想,使待擬訂的試驗方案能針對主題,確切而有效地解決問題。
2.處理適當(dāng)
根據(jù)試驗?zāi)康拇_定供試因素及其水平。供試因素一般不宜過多,應(yīng)該抓住1~2個或少數(shù)幾個主要因素解決關(guān)鍵性問題。每個因素的水平數(shù)目也不宜過多,且各水平間距要適當(dāng),使各水平能有明確區(qū)分,并把最佳水平范圍包括在內(nèi)。
3.嚴密的可比性
一般試驗采用差異比較來確定試驗因素的效應(yīng)。為了保證試驗結(jié)果的嚴密可比性,在設(shè)計試驗方案時必須遵循如下原則:
(1)唯一差異原則 在試驗中,除了要研究的因素設(shè)置不同的水平外,其余因素均應(yīng)保持相對一致,以排除非試驗因素的干擾。例如根外噴施磷肥的試驗方案中如果設(shè)噴磷(A)與不噴磷(B)兩個處理,則兩者間差異含有磷的作用,也有水的作用,這時磷和水的作用混雜在一起解析不出來。若加入噴水(C)處理,則磷和水的作用可分別從A與C及B與C的比較中解析出來,因而可進一步明確磷和水的相對重要性。
(2)設(shè)置對照 農(nóng)業(yè)試驗中常以常規(guī)的農(nóng)藝措施為比較的基準(zhǔn),這個比較的基準(zhǔn)就是對照。肥料試驗中,常以不施肥處理作為空白對照。品種比較試驗中常統(tǒng)一用同一生態(tài)區(qū)域內(nèi)使用的標(biāo)準(zhǔn)(對照)種,以便作為各試驗單位共同的比較標(biāo)準(zhǔn)。
4.試驗的高效性
復(fù)因素試驗提供了比單因素試驗更多的效應(yīng)估計,具有單因素試驗無可比擬的優(yōu)越性。但當(dāng)試驗因素增多時,處理組合數(shù)迅速增加,要對全部處理組合進行全面試驗,規(guī)模過大,往往難以實施,因而復(fù)因素試驗的應(yīng)用常常受到限制。
二、田間試驗計劃書的內(nèi)容
1.試驗名稱、時間與地點
要求能反映出這一試驗的主要內(nèi)容,如“大豆穴播與品種分枝力關(guān)系的研究”。有時也常在課題名稱中反映出這一試驗的時間、負責(zé)進行的單位與地點或?qū)r間、單位與地點寫在題目下面。
2.試驗?zāi)康摹⒁罁?jù)及預(yù)期的試驗結(jié)果 試驗必須有明確的目的。豐產(chǎn)栽培試驗的主要目的是要達到一定產(chǎn)量指標(biāo)。因此,在試驗計劃中應(yīng)寫明要達到的產(chǎn)量指標(biāo)。如果是對比試驗,就要寫上進行這項試驗要解決什么問題。有的試驗在寫試驗?zāi)康臅r,還同時提出試驗的根據(jù),試驗?zāi)壳暗难芯砍晒l(fā)展趨勢及預(yù)期成果。如大豆穴播與品種分枝力關(guān)系的研究試驗?zāi)康摹按蠖箼C械穴播具有高產(chǎn)、鏟地省工、播種省籽等優(yōu)點,深受廣大農(nóng)民歡迎,栽培面積不斷擴大,已經(jīng)列為黑龍江省大豆三種主要栽培模式之一。不同的播種方法由于植株密度和分布的不同,對品種性狀要求便不盡相同。過去有些農(nóng)業(yè)科技人員認為:穴播大豆因為種植密度小,要求植株繁茂分枝力強的品種;也有的人認為穴播大豆由于每穴植株比較集中,適合種植主稈發(fā)達,分枝力弱的品種。為了明確大豆穴播與品種分枝力的關(guān)系,才進行了這一試驗,為穴播大豆進行品種選擇和育種單位制定育種目標(biāo)提供科學(xué)依據(jù)”。試驗?zāi)康囊欢ㄒ獙懙妹鞔_,能真實地反映對試驗的具體要求,使大家一看就知道這一試驗為什么做,預(yù)期能達到什么結(jié)果。文字要求簡明扼要,可以分條說明。
3.試驗材料
寫明供試土壤、供試作物和試驗材料等。 4.試驗處理方案
試驗方案是全部試驗工作的核心。它是根據(jù)試驗?zāi)康囊螅?jīng)過精密考慮,仔細討論后被提出來的。本試驗要采用幾個處理,要在試驗計劃中寫清楚,有對照處理的,要把對照處理明確寫明。
5.試驗設(shè)計方法與內(nèi)容
包括小區(qū)面積、長寬比例、重復(fù)次數(shù)及排列方法等。據(jù)此可作出田間試驗布置圖。根據(jù)田間布置圖,在已準(zhǔn)備好的試驗地上布置試驗的各個處理小區(qū)。
6.整地、播種或移栽、施肥及田間管理措施
主要有整地方法、耕翻深度,施肥數(shù)量、種類、時期和方法,播種時期、方法和密度,灌溉次數(shù)、時期;中耕除草、防治病蟲害以及其他管理等。
7.田間觀察記載和室內(nèi)考種、分析測定項目及方法。
8.收獲計產(chǎn)方法
9.試驗資料的統(tǒng)計方法和要求(參考第七章) 10.試驗地面積、試驗經(jīng)費、人力及主要儀器設(shè)備
試驗應(yīng)根據(jù)勤儉的原則,在不影響完成試驗的前提下,充分利用現(xiàn)有設(shè)備,節(jié)約各種物資材料。如果必須增添設(shè)備、人力、材料,應(yīng)當(dāng)將需要的名稱、數(shù)量、金額等詳細寫在計劃書上,以便早作準(zhǔn)備如期解決,防止影響試驗的順利進行。
11.項目負責(zé)人、執(zhí)行人
12.附田間試驗布置圖及各種記載表
根據(jù)田間試驗方案的具體要求,結(jié)合供試驗使用的土地形狀及土壤肥力趨向,具體設(shè)計小區(qū)面積、長寬比例、重復(fù)次數(shù)及排列方法等,把這些要素設(shè)計繪制成圖紙即成為田間試驗布置圖。在田間試驗布置圖上應(yīng)根據(jù)既定的標(biāo)準(zhǔn),按實際比例尺繪制試驗區(qū)各個重復(fù)、小區(qū)、走道和保護行等內(nèi)容,標(biāo)明不同處理排列的位置以及試驗區(qū)周圍的環(huán)境狀況,圖上還應(yīng)注明方位和邊界,以便田間區(qū)劃、播種管理和田間觀測記載時能按圖行事。試驗布置圖除必須考慮小區(qū)、保護行設(shè)置外,還應(yīng)設(shè)置走道。一般小區(qū)相連種植,每個小區(qū)扣除邊行后得實際計產(chǎn)面積,邊行寬度多為0.5m,其試驗布置圖如圖3-1。
道
路
圖3-1 田間試驗布置圖(單位:米,比例尺1:500)
一份試驗計劃除要包括以上各項主要內(nèi)容外,有時為了說明與本試驗有關(guān)的基本情況,說明提出試驗根據(jù)和進行本項試驗的意義,還可以在試驗計劃開頭加上一段類似序言的說明文字。有些試驗所用的方法比較特殊,應(yīng)在計劃中加上一項試驗方法。有些試驗還包括一些輔助性試驗,如盆栽試驗、室內(nèi)分析等,應(yīng)在計劃上列出有關(guān)項目。有些試驗不只是在一個地方進行,應(yīng)當(dāng)在計劃上列出試驗地點,以及各試驗點供試地段的基本情況,如地勢、土壤情況、前作以及其他等。如果同一試驗由幾個單位、幾個人共同負責(zé),同時又有明確分工,也應(yīng)當(dāng)在試驗計劃上寫明這些情況,或者在計劃上加上組織領(lǐng)導(dǎo)一項。總之,為保證試驗順利進行,各項規(guī)定都應(yīng)寫在計劃上。但也要求簡明扼要,條理清晰,可寫可不寫的就不要寫,能夠用表格形式表達的,盡量采用表格。
三、田間試驗計劃書格式
1.封面 寫明試驗名稱、計劃書編制者或編制小組名稱以及設(shè)計時間等。 2.選題依據(jù)及試驗?zāi)康囊?3.試驗材料和試驗地條件 4.試驗方法
篇五:實 驗 計 劃 書
實 驗 計 劃 書
題目:巴氏桿菌的分離及鑒定實驗方案
組數(shù):第三組
組長:李揚帆
組員:蘇曉娟 王逸涵 海旭南 孫春亮 劉長寶 劉珊 陳紅 劉明超 盧寧 年級:08級
專業(yè):動物醫(yī)學(xué)專業(yè)
實驗?zāi)康模?/p>
(1)掌握多殺性巴氏桿菌分離的基本要領(lǐng)和方法
(2)掌握多殺性巴氏桿菌培養(yǎng)的原理和方法
(3)掌握有關(guān)多殺性巴氏桿菌的生化試驗
(4)通過多殺性巴氏桿菌的分離與鑒定,掌握大腸桿菌的分離和鑒定程序,由此推廣到生產(chǎn)實踐的應(yīng)用中去。
試劑:
瓊脂、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、氯化鈉、吲哚試劑、草酸銨結(jié)晶紫,革蘭氏碘液,95%酒精,石炭酸復(fù)紅,蒸餾水,生理鹽水,二甲苯,香柏油,1%中性紅水溶液,無菌的脫纖綿羊或家兔鮮血,靛基質(zhì)試劑,3%過、膽鹽、枸櫞酸鹽、蔗糖、酵母膏、硫代硫酸鈉、0.4%酚紅水溶液、磷酸氫二鉀 實驗器材:
滅菌的手術(shù)刀,鑷子,刀片,玻璃皿、染液缸、接種環(huán)、試管夾、載玻片、擦鏡紙、濾紙、顯微鏡、酒精棉、超凈工作臺、恒溫箱、高壓滅菌鍋、試管、培養(yǎng)皿、接種針、漏斗、鐵架臺、玻璃棒等。
病料采集:
取巴氏桿菌致死的小鼠,腹部向上固定于蠟盤上,用酒精棉球消毒體表,打開腹腔,暴露肝臟,用剪刀在火焰燒灼滅菌,在肝臟表面燙之殺死表面雜菌,隨即在灼燒部位刺一小孔,用滅菌接種環(huán)深入灼燒部位小孔中,將接種棒輕輕旋轉(zhuǎn)2次,借以達到取足采料的目的。
涂片染色鏡檢:
美蘭染色: 巴氏桿菌致死的小鼠,肝臟或脾臟觸片,或心血涂片,以堿性美蘭液或瑞氏染色液染色,如發(fā)現(xiàn)典型的兩極著色的短桿菌
革蘭氏染色:巴氏桿菌致死的小鼠,肝臟或脾臟觸片,或心血涂片,革蘭氏染色陰性
分離培養(yǎng)鑒定:
增菌培養(yǎng):
血清肉湯培養(yǎng)基:在血清肉湯中培養(yǎng),開始輕度渾濁,4-6d后液體變清朗,管底出現(xiàn)黏稠沉淀,振搖后不分散,表面形成菌環(huán)。
分離培養(yǎng):
①取巴氏桿菌致死的小鼠,腹部向上固定于蠟盤上,用酒精棉球消毒體表,打開腹腔,暴露肝臟,用剪刀在火焰燒灼滅菌,在肝臟表面燙之殺死表面雜菌,隨即在灼燒部位刺一小孔,用滅菌接種環(huán)深入灼燒部位小孔中,將接種棒輕輕旋轉(zhuǎn)2次,借以達到取足采料的目的。
②在血液平板上劃線培養(yǎng),37℃培養(yǎng)24h,觀察菌落形態(tài)、大小、溶血狀況等。多殺性巴氏桿菌在血液平板上長成淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落。 ③挑取疑似菌落4-6個:分別作以下實驗
Ⅰ用血瓊脂平板進行分離培養(yǎng),血液平板上長成淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落,無溶血現(xiàn)象, 革蘭氏染色為陰性球桿菌
Ⅱ用麥康凱瓊脂進行分離培養(yǎng),麥康凱培養(yǎng)基上不生長
Ⅲ將此菌接種在三糖鐵培養(yǎng)基上可生長,并使底部變黃。
④多殺性巴氏桿菌的純培養(yǎng)
細菌生化試驗:
(1)甲基紅試驗(MR試驗):
原理:細菌分解葡萄糖產(chǎn)酸,使培養(yǎng)液呈酸性,滴加甲基紅試劑呈紅色。 方法:細菌接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基
結(jié)果:陽性反應(yīng):呈紅色 陰性反應(yīng):無變化
(2)吲哚試驗(靛基質(zhì)試驗)
原理:細菌分解色氨酸產(chǎn)生靛基質(zhì),與靛基質(zhì)試劑結(jié)合形成紅色的化合物而呈色。 方法:細菌接種于蛋白胨水培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)2-3天,沿試管壁緩慢加入靛基質(zhì)試劑,靜置5分鐘,觀察結(jié)果
結(jié)果:陽性反應(yīng):紅色環(huán)狀物 陰性反應(yīng):無變化
(3)氧化酶試驗:陽性
加2-3滴試劑于濾紙上,用牙簽挑去一個菌落到紙上涂布,觀察菌落的反應(yīng)。陽性反應(yīng)在5-10s內(nèi)有粉紅到黑色,15min后可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。 用95%酒精配制的1%的
(4)觸酶試驗:陽性
將3%過氧化氫在載玻片上,挑菌觀察有無氣泡產(chǎn)生即可。陽性反應(yīng)者有氣泡,無則為陰性。
(5)VP試驗:陰性
取24h的純培養(yǎng)物,接種于葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基中,置于37℃培養(yǎng)48-72小時,取出后在培養(yǎng)基中先加入VP試劑甲液0.6ml,再加入乙液0.2ml。靜止在試管架上,15min后培養(yǎng)液呈紅色者為陽性。
(6)糖發(fā)酵試驗:
原理:細菌分解糖產(chǎn)酸使培養(yǎng)液呈酸性,指示劑表現(xiàn)呈色反應(yīng)。
方法:細菌接種于糖發(fā)酵管內(nèi),37℃培養(yǎng)24小時,觀察結(jié)果。結(jié)果觀察:培養(yǎng)基為黃色者,記為+;變黃且產(chǎn)氣泡者,記為(+);否則記為-
葡萄糖發(fā)酵管,乳糖發(fā)酵管,蔗糖發(fā)酵管,果糖發(fā)酵管,麥芽糖發(fā)酵管,各兩個 結(jié)果:陽性反應(yīng):從藍紫色變?yōu)辄S色 陰性法應(yīng):仍呈藍紫色
(7)明膠穿刺試驗:
取純培養(yǎng)物穿刺接種至半固體瓊脂培養(yǎng)基,穿刺線應(yīng)在培養(yǎng)基中間,直至管底,拔出時應(yīng)原路返回。結(jié)果說明:若該菌有鞭毛,能運動,則部分或全部半固體瓊
脂變渾濁。不運動者只在穿刺線上生長。
(8)抑菌試驗
取菌,用棉簽用棉簽致密接種于血清瓊脂平板上,用無菌鑷子將各種抗菌藥物圓紙片,分別貼于培養(yǎng)基表面,各片距離要相等。37度培養(yǎng)24h,觀察結(jié)果。 血清學(xué)鑒定
毒力因子檢測及抗原鑒定:
取純培養(yǎng)物用0.5%氯化鈉溶液洗下制成濃菌液,并分成2份。一份經(jīng)100度加熱1小時(如仍有不凝集性,則在121度下處理2小時)。另一份用0.5%福爾馬林37度作用24~48小時。分別用各種抗O血清和抗OK血清對上述菌液做玻板凝集實驗。如該菌株含K抗原,則各種抗O血清不能使福爾馬林處理的菌液凝集,但可被各種抗OK血清中的一種凝集。經(jīng)100度或者121度加熱的菌液可被一種抗O血清凝集,但可能與別的抗O血清發(fā)生交叉凝集,可用試管凝集法按凝集效價來排除。H抗原一般不做鑒定。
試驗項目分配